行业研究-肿瘤标志物

关于肿瘤标志物

概述

肿瘤标志物又称肿瘤标记物，是指特征性存在于恶性肿瘤细胞，或由恶性肿瘤细胞异常产生的物质，或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质，并能反映肿瘤发生、发展，监测肿瘤对治疗反应的一类物质。肿瘤标志物存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中，能够用免疫学、生物学及化学的方法检测到。

来源

①肿瘤细胞的代谢产物，如：糖酵解产物、组织多肽抗原、核酸分解产物。②分化紊乱的细胞基因产物，如：异位的ACTH片段，甲胎蛋白、癌胚抗原、胎儿同工酶。③肿瘤细胞坏死崩解释放进入血液循环的物质，主要是某些细胞骨架蛋白成分，如细胞角质素片段抗原21-1 （Cyfra21-1），多胺类物质。④肿瘤宿主细胞的细胞反应性产物，如：VCA-IgA、EA-IgA。

体检常见肿瘤标志物

常见的体检项目可分为如下几种：①血清癌胚抗原（CEA）：正常值小于等于3.45微克/升。最初在结肠癌患者中发现CEA升高，后来发现，在胃癌、尿道癌、卵巢癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、甲状腺髓样癌、膀胱癌和宫颈癌患者中，有30%的患者血CEA升高。②甲胎蛋白（AFP）：AFP是最早发现的肿瘤标志物，是诊断原发性肝癌的常用检查项目，约87%的原发性肝癌患者，AFP高达20微克/升以上。③前列腺特异抗原（PSA）：正常值小于4微克/升，在前列腺癌中阳性率高达30%～86%，其升高水平与肿瘤密切相关。④绒毛膜促性腺激素（HCG）：正常人血中浓度小于5微克/升，如患绒毛膜上皮癌，睾丸和卵巢的胚胎性恶性畸胎瘤者，HCG可升高，且血、尿中的HCG的含量多少与预后相关联。

用途

①肿瘤的早期发现；②肿瘤普查、筛查；③肿瘤的诊断、鉴别诊断与分期；④肿瘤患者手术、化疗、放疗疗效监测；⑤肿瘤复发的指标；⑥肿瘤的预后判断；⑦寻找不知来源的转移肿瘤的原发灶。

注意事项

①肿瘤标志物非常之多，单个标记物的敏感性或特异性往往偏低，不能满足临床要求，理论上和实践上都提倡一次同时测定多种标志物，以提高敏感性和特异性。②肿瘤标志物不是肿瘤诊断的惟一依据，临床上需结合临床症状、影像学检查等其他手段综合考虑。肿瘤确诊一定要有组织或细胞病理学的诊断依据。③因患者个体差异、患者具体临床情况等因素，肿瘤标志物的分析要结合临床情况，从多个角度比较，才能得出客观真实的结论。④某些肿瘤标志物在某些生理情况下或某些良性疾病也可以异常升高，需注意鉴别。

常见肿瘤标志物

来源：免疫组织化学质控抗体介绍

Actin（SM）：平滑肌肌动蛋白

阳性部位：细胞浆。对照：平滑肌。

此抗体可以与平滑肌肌动蛋白α异构体反应，与骨骼肌、心肌的肌动蛋白无交叉反应。可标记平滑肌细胞，包括肌上皮细胞。用于平滑肌肿瘤的鉴别诊断，也可用于乳腺、唾液腺和汗腺肌上皮的识别。

BCL-2

阳性部位：细胞膜／浆。对照：淋巴结。

Bcl-2蛋白抑制细胞凋亡。套区的小B淋巴细胞和许多T细胞通常表达Bcl-2，伴有t（14；18）（q32；q21）移位的滤泡性淋巴瘤Bcl-2超表达。85%的滤泡性淋巴瘤和20%的弥漫大B细胞淋巴瘤表达Bcl-2，且都伴有t（14；18）移位，但无t（14；18）的淋巴瘤也可以表达Bcl-2。胸腺组织也表达Bcl-2，但多数细胞在髓质、皮质仅弱阳性表达。Bcl-2在正常乳腺上皮强阳性表达，并且正常乳腺小叶周围的基质中一些细胞也阳性。乳腺癌通常表达Bcl-2，尤其是年龄大的病人，低级别的、体积小的、ER或PR阳性的肿瘤。随着肿瘤的进展，Bcl-2表达有减弱的趋势，他莫西芬可降低其表达。Bcl-2可用与滤泡性淋巴瘤和滤泡性增生鉴别：85%的滤泡性淋巴瘤细胞浆阳性，而滤泡性增生只有生发中心部位散在的T细胞阳性。Bcl-2在单核样B细胞淋巴瘤中阳性，而在单核样B细胞增生病灶中阴性，因而具有鉴别价值。Bcl-2还可以用于确定滤泡性淋巴瘤是否累及骨髓。原发性乳腺癌通常Bcl-2阳性，而肺和胃肠道肿瘤转移到乳腺的罕见阳性(即使阳性，也是灶性弱表达)。在一些癌中，Bcl-2阳性是预后较好的一个指标，与P53的表述呈负相关。在宫颈上皮内瘤变中，Bcl-2阳性的细胞与CIN的级别相关。大多数基底细胞癌弥漫表达Bcl-2，但大汗腺上皮肿瘤表层细胞着色。

CD3

阳性部位：细胞膜，CD3ε胞浆表达。对照：淋巴结。

CD3分子是由五条肽链以非共价键组成的复台分子，分别称为γ、δ、ε、ξ、η，表达于所有T细胞表面。CD3分子与T细胞抗原识别受体(TCR)组成复合受体分子，是T细胞识别抗原的主要识别单位，具有稳定TCR结构和传递活化信号的作用。除了小脑的蒲肯野细胞弱阳性表达CD3之外，B细胞、髓细胞、巨噬细胞和其他任何细胞均不表达CD3。 因此，CD3是比较特异的T细胞抗体。此抗体可识别瘤性和非瘤性的T淋巴细胞以及NK细胞。某些蕈样霉菌病、多形性淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤可出现CD3阴性。CD3ε可以表达于鼻型NK／T细胞淋巴瘤。

CD20

阳性部位：细胞膜。对照：淋巴结。

CD20分布于所有成熟的B细胞，但浆细胞多为阴性。大多数B细胞淋巴瘤、一些骨髓瘤和约50％的B淋巴母细胞淋巴瘤表达CD20，并且一些T淋巴细胞也可弱表达CD20。CD20是B细胞较特异的抗体。此抗体多用于标记B淋巴细胞和B细胞淋巴瘤以及毛细胞白血病。

CD30

阳性部位：细胞膜/浆。对照：淋巴结。

Ki-1抗体识别细胞内蛋白和一种跨膜糖蛋白。Ki-1抗体与细胞内蛋白反应可能是由于一些Ki-1阳性的细胞不能用Ber-H2再复制。跨膜糖蛋白常被认为是真正的CD30抗原，Ber-H2可识别被常规固定封闭的一个抗原决定簇。CD30基因定位于染色体的1p36，是淋巴瘤一个活化基因。在以下非淋巴瘤组织中CD30弱阳性表达：活化的T和B淋巴细胞；EB病毒感染的B淋巴细胞；亲T淋巴细胞病毒感染的T淋巴细胞；正常和反应性淋巴滤泡周围弥散的T和B淋巴细胞；结核、描抓病、弓形虫感染及结节病形成的肉芽肿中的巨噬细胞；胰腺的外分泌部的细胞；大脑皮质的神经元；普肯耶细胞；脂肪母细胞；肌上皮细胞。培养的单核细胞可表达Ki-1但不表达Ber-H2。尽管CD30最初是从蜕膜细胞中检测出来的，但后来的研究证实蜕膜细胞井不一定全部阳性。几乎所有经典型霍奇金淋巴瘤的R-S细胞表达CD30，染色特点是细胞膜及高尔基体区着色。大细胞间变性淋巴瘤的T细胞、B细胞及裸细胞、外周T细胞淋巴瘤、淋巴瘤样丘疹病、退行性变非典型组织细胞增生症、生殖细胞肿瘤和血管瘤表达CD30，偶尔浆细胞淋巴瘤／骨髓瘤和胰腺及唾液腺肿瘤阳性表达。白血病、淋巴瘤、横纹肌肉瘤、滑膜肉瘤、脂肪肉瘤、腱鞘的巨细胞肿瘤、恶性纤维组织细胞瘤、骨肉瘤、Ewing肉瘤，恶性施万细胞瘤、神经节细胞肿瘤和侵袭性纤维瘤病罕见CD30阳性。此抗体主要标记霍奇金淋巴瘤的R-S细胞、大细胞间变性淋巴瘤、淋巴瘤样丘疹病。

CD34

阳性部位：细胞膜。对照：淋巴结、血管瘤、胃肠间质肿瘤。

CD34是由位于1q32的基因编码的相对分子质量为110 000的单链跨膜糖蛋白，可表达干正常的内皮细胞、脾边缘带细胞、环绕于血管、神经、肌束、皮肤附属器和乳腺小叶基质周围的树突状间质细胞。在血管肿瘤中CD34阳性表达，但CD34的特异性和敏感性均低干CD31。CD34还可表达于以下组织中：未成熟的白血病(包括AML、ALL和粒细胞肉瘤)、琳巴母细胞淋巴瘤、转化性骨髓发育不良、平滑肌细胞及其来源的肿瘤、胃肠道间质肿瘤、神经鞘瘤、脂肪瘤、上皮样肉瘤等。良恶性纤维组织细胞瘤和纤维肉瘤很少阳性，肉瘤样间皮瘤、滑膜肉瘤和纤维瘤病不表达CD34。CD34主要用于判定是否有内皮细胞的分化，与CD117联合应用鉴定胃肠道间质瘤，鉴别单纯性纤维肿瘤(通常阳性)和肉瘤样间皮瘤(通常阴性)、隆凸型皮肤纤维肉瘤(通常阳性)和良性纤维组织细胞瘤(通常阴性)、乳腺的梭形细胞癌(CD34-)和恶性叶状肿瘤(CD34+)。

CD68

阳性部位：细胞／浆。对照：淋巴结。

CD68是一种相对分子质量为110 000的细胞浆糖蛋白，与溶酶体颗粒有关，是巨噬细胞最可靠的标记。CD68表达于以下细胞中：单核细胞、巨噬细胞、粒细胞(只表达KP1，不表达PG-M1)、嗜碱性粒细胞、大淋巴细胞、破骨细胞、肥大细胞(只表达PG-M1，不表达KP1)、滑膜细胞(只表达PG-M1，不表达KP1)、朗格汉斯巨细胞、树突状网织细胞肉瘤和黑色素瘤。此抗体可用于真性组织细胞淋巴瘤、AML、粒细胞肉瘤(但注意B细胞淋巴瘤胞浆弱阳性)、Kikucki病中浆样单核细胞和肥大细胞增多症的诊断。

CD117

阳性部位：细胞膜／浆。对照：淋巴结、胃肠间质肿瘤。

c-kit原癌基因定位干染色体4q11-12，编码相对分子质量为135 000的Ⅲ型跨膜醅氨酸激酶受体蛋白。配位体是早期血细胞生长因子，也是生殖细胞和黑色素细胞生长所需。CD117在正常细胞和肿瘤中均有表达，包括肥大细胞、蜕膜细胞、80%~100%的胃肠道间质瘤、黑色素瘤、一些生殖细胞肿瘤、某些AML、某些皮肤纤维瘤、某些血管肉瘤和Ewing肉瘤。平滑肌肿瘤和神经性肿瘤CD117阴性。由于CD117的广泛表达，因此应用范围较窄。此抗体主要用于胃肠道间质肿瘤的诊断。

Chromogranin A

阳性部位：细胞浆。对照：肾上腺。

嗜铬素(A，B，C)分布广泛，是一组可溶性酸性蛋白，相对分子质量为76 000～120 000。嗜铬素A不仅存在于神经内分泌细胞的分泌颗粒中，也广泛分布于所有含有分泌颗粒的内分泌细胞和神经内分泌细胞来源的肿瘤细胞。此抗体可以识别嗜铬素抗原羧基末端的片段，而不与氨基末端的片段反应，在甲状腺髓样癌、甲状旁腺肿瘤、副神经节瘤、粪癌等神经内 分泌肿瘤中阳性表达。主要用于标记神经内分泌细胞及其来源的肿瘤，并且可以作为甲状腺髓样癌和滤泡癌的鉴别。

CK（pan）

阳性部位：细胞浆。对照：结肠、乳腺。

AE1可与太多数的酸性细胞角蛋白(Ⅰ型)反应，而AE3识别所有已知的碱性细胞角蛋白(Ⅱ型)。AE1／AE3抗体的混合物，包括CK1-8、10、14、15、16、19。该抗体可与几乎所有的上皮反应(除肾上腺、肝细胞肿瘤，精原细胞瘤，一些肾细胞肿瘤，一些类癌和胰岛细胞)而与一些中间丝状蛋白无交叉反应。此抗体可用于鳞状细胞肿瘤(包括梭形细胞变异型)、腺癌、移形细胞癌、小细胞癌、类癌、多型性腺瘤(上皮成分)、胸腺瘤、间皮瘤(包括肉瘤样成分)、脊索瘤，生殖细胞肿瘤(除外精原细胞瘤)、滑膜肉瘤和上皮样肉瘤的诊断中。

CK7

阳性部位：细胞浆。对照：乳腺。

此抗体识别的是相对分子质量为54 000的一种碱性细胞角蛋白，存在于大多数正常组织的腺上皮和移行上皮细胞中，一般非上皮来源的细胞无表达。卵巢浆液性和子宫内膜样腺癌、乳腺腺癌、肺腺癌中呈阳性反应，而胃肠道的腺癌、卵巢黏液性腺癌阴性。另外在官颈肿瘤、胆管癌、膀胱移行细胞癌中也为阳性表达。在鳞状细胞癌、肝细胞和肝细胞癌、前列腺和列腺癌、肾上皮性肿瘤中均为阴性。 诊断意义：现通常认为CK7是腺癌和移行上皮细胞癌的比较特异性的标志。与CK20和Villin联台应用有助于确定腺癌的原发部位；可用于肾细胞癌、嫌色细胞癌、嗜酸细胞癌的鉴别诊断。

EMA

阳性部位：细胞浆/膜。对照：阑尾。

EMA是一种相对分子质量为400 000的跨膜糖蛋白，广泛分布于各种上皮细胞及其来源的肿瘤。此抗体可以标记大部分正常上皮及上皮源性的肿瘤；在间皮瘤中常为胞浆着色；浆细胞、各种已受T细胞活化的外周血B细胞及一些间充质(脊索和神经周围纤维母细胞)也为阳性；淋巴瘤中T细胞丰富的B细胞淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤及其变异型、95％的大细胞间变型、单核样的B细胞淋巴瘤以及18％的T细胞淋巴瘤阳性表达；还可在一些骨髓瘤、60％的结节性淋巴细胞为主霍奇金淋巴瘤、滑膜肉瘤、上皮样肉瘤等肿瘤中阳性表达。EMA常用于间皮反应和间皮瘤的鉴别(间皮瘤中的膜染色更强)；间皮瘤和腺癌的鉴别(前者细胞膜着色)；基底细胞、鳞状细胞与皮肤基底细胞癌的鉴别；淋巴结ALK阳性的大细胞间变型淋巴瘤同其他淋巴瘤类型的鉴别。

ER

阳性部位：细胞核。对照：乳腺。

雌激素受体存在于正常女阴皮肤、上皮、基底细胞，还有正常子宫上皮、肌层细胞以及正常乳腺上皮细胞中。会阴部的纤维上皮性息肉、平滑肌瘤、冲经鞘肿瘤、血管肌纤维母细胞瘤中同样为阳性表达。 实验表明在以下肿瘤中也有表达：乳腺癌、上皮样平滑肌肿瘤、黑色素瘤、脑膜瘤、硬化性血管瘤、甲状腺腺瘤、卵巢和子宫内膜肿瘤、侵袭性盆腔粘液瘤、一些肺癌。ER表达阳性的乳腺癌病人如果对其进行激素治疗往往有效，预后较好，因此ER（与PR和C-erbB-2一道）已作为乳腺癌病人的常规检查项目之一。

HER-2 （C-erbB-2）

阳性部位：细胞膜。对照：乳腺癌。

C-erbB-2是一种癌基因。此基因所编码的蛋白是相对分子质量为185 000的穿膜蛋白，可以抑制酪氨酸激酶活性。该基因的过度表达和扩增可见于多种肿瘤，尤其是腺癌中，与肿瘤的分化程度和分级有密切关系。Wright等人对乳癌研究表明：此基因超量表达者术后早期复发的危险增加，总生存期缩短，2年生存率的可能性下降为0。此抗体主要作为判断乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌及消化道肿瘤预后的参考指标以及乳腺癌患者是否可以使用赫赛汀进行治疗。研究表明，对ER/PR和c-erbB-2三者同时阳性表达的病人进行三苯氧胺治疗无意义。

HMB-45

阳性部位：细胞浆。对照：恶性黑色素瘤。

这一抗体标记未成熟黑色素颗粒。在活化和瘤变的黑色素细胞和其他神经嵴来源肿瘤中阳性表达。在正常乳腺上皮和一些乳腺癌、正常汗腺和汗腺来源肿瘤、血管肌脂瘤等组织中可为阳性表达，偶尔在癌中有所表达。在判断恶性黑色素瘤方面比S-100或NKl/C3特异性更高，但是敏感性低于90％，尤其是在转移性黑色素瘤中。

Ki-67

阳性部位：细胞核。对照：淋巴结。

Ki-67可以识别出在细胞增殖周期G1、S、G2和M期的细胞，而处在G0期的细胞不着色。可判断细胞的增殖活性，是确定良恶性组织生长状态的标记。研究表明，它与乳腺癌的组织学分型、核分裂指数和淋巴结转移情况密切相关，由于Ki-67比PCNA更为直接反应细胞的增殖情况，因此常用于某些恶性肿瘤预后的一个重要参考指标。有助于判断淋巴瘤的恶性程度，高级别淋巴瘤Ki-67一般大于40%或50%。

PR

阳性部位：细胞浆。对照：乳腺癌。

免疫组织化学：乳腺、女性生殖道组织、卵巢、正常的外阴皮肤。另外，还可表达于外阴纤维上皮囊肿、阴道平滑肌肿瘤、阴道神经鞘肿瘤，阴道血管肌纤维母细胞瘤，浸润性骨盆血管黏液瘤、内膜间质肿瘤及一些肺癌。

P63

阳性部位：细胞核。对照：前列腺、扁桃体。

P63是抑癌基因P53的同源性基因，在前列腺基底细胞中被发现，然而在恶性前列腺肿瘤中为阴性。因此P63为鉴别前列腺良、恶性肿瘤的有效标记物。可以和其他抗体如：HMW CK、PSA、PSAP等联合应用。P63可能在维持前列腺干细胞数量中起重要作用。

TTF-1

阳性部位：细胞核。对照：甲状腺、肺。

甲状隙转录因子表达于甲状腺腺上皮和肺的上皮细胞中。在肺肿瘤研究中发现，大多数的肺小细胞癌、原发性和转移性肺腺癌、少部分大细胞未分化癌、大多数非典型神经内分泌肿瘤的免疫组化结果显示甲状腺转录因子阳性，而肺鳞癌及绝大多数典型性类癌阴性；在甲状腺乳头状腺癌中甲状腺转录因子也阳性，而在其他组织表达阴性。据此认为甲状腺转录因子可用来鉴别肺腺癌与鳞癌，并有助于与肺转移性腺癌的鉴别。肝细胞胞浆可呈颗粒状阳性。

Vimentin

阳性部位：细胞浆。对照：平滑肌僧。

波形蛋白相对分子质量是57 000被认为是原始的中间丝之一，是正常间叶细胞及其来源的肿瘤的特异性标志，此抗体的免疫原为猪的晶体，但可与人、大鼠和鸡的波形蛋白反应，与胶原纤维酸性蛋白和结蛋白等中间丝蛋白无交叉反应，在一些上皮细胞核或肿瘤中同时表达波形蛋白和细胞角蛋白。表达于再生的肌纤维；和细胞角蛋白同时表达在肺、涎腺、肝、肝细胞和胆道、甲状腺、肾小管、性腺、子宫内膜、肾上腺皮质的肿瘤或上皮；还报道表达在皮肤、乳腺、胃、尿道上皮、前列腺、卵巢皮质、大多数梭形细胞肿瘤、一些渗透或转移到体液中的肿瘤细胞。波形蛋白是一种有用的。“控制标记物”，可用为阳性对照。也就是说，如果波形蛋白不能很容易的表达在非肿瘤性的内皮细胞、纤维母细胞和其他间充质成份，关于组织的免疫反应状态的保存可能是一个问题。波形蛋白在肿瘤诊断中的作用因为其普遍存在受到限制，然而在恶性横纹肌肿瘤它经常形成特征性的球形细胞浆。鉴别间皮瘤和腺癌，波形蛋白常常和细胞角蛋白共同表达在间皮瘤的上皮细胞上。未知原发灶的肿瘤如同时波形蛋白和细胞角蛋白表达强阳性则可能预示原发于肾、子宫内膜和甲状腺。